條件恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（FCS）用于小型嚙齒類動(dòng)物（大、小鼠）環(huán)境相關(guān)條件性恐懼實(shí)驗(yàn)研究。嚙齒類動(dòng)物在恐懼時(shí)會(huì)表現(xiàn)出特有的不動(dòng)狀態(tài)（immobility），動(dòng)物在這種情況下傾向于保持靜止不動(dòng)的防御姿勢(shì)。抗抑郁藥和抗中樞興奮藥可以明顯縮短不動(dòng)狀態(tài)持續(xù)的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)對(duì)象被給與一個(gè)聲音信號(hào)（條件刺激），隨后給予電擊（非條件）刺激。該訓(xùn)練稱為條件性訓(xùn)練，訓(xùn)練結(jié)束后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行聲音信號(hào)或環(huán)境聯(lián)系性實(shí)驗(yàn)。一般情況下嚙齒類動(dòng)物對(duì)相應(yīng)的環(huán)境和不同環(huán)境下同樣的聲音信號(hào)都會(huì)做出明顯的條件性恐懼反應(yīng)，如靜止不動(dòng)。這種測(cè)試可以在訓(xùn)練結(jié)束后立刻或幾天后進(jìn)行可以提供在條件信號(hào)影響下短期和長(zhǎng)期記憶的信息。

實(shí)驗(yàn)方式（1）

包括三個(gè)階段

第一階段：條件性訓(xùn)練（第1天）

無(wú)刺激     180s

聲音信號(hào)   30s

電擊       2s

無(wú)刺激     20s
第一階段為訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被給予條件性聲音刺激。

第二階段：環(huán)境相關(guān)（2天）

無(wú)刺激     180s

第二階段將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入第一階段中的環(huán)境中以期評(píng)價(jià)環(huán)境相關(guān)的條件性恐懼程度。

第三階段：改變的環(huán)境相關(guān)信息（2天+2h）

無(wú)刺激    180s

聲音      180s

無(wú)刺激    60s

改變環(huán)境信息（比如在實(shí)驗(yàn)箱中放入一個(gè)分隔板、改變光源和背景噪音或用其他溶液清洗實(shí)驗(yàn)箱等）后觀察動(dòng)物的條件性恐懼程度。刺激的順序由實(shí)驗(yàn)者決定。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后通過(guò)軟件分析系統(tǒng)對(duì)記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

 以上的實(shí)驗(yàn)中，第二階段沒(méi)有給與任何刺激但是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物表現(xiàn)出明顯的環(huán)境相關(guān)性恐懼，表現(xiàn)為活動(dòng)性明顯減少，但是并沒(méi)有出現(xiàn)freezing反應(yīng)。在第三階段，同一只動(dòng)物在改變了環(huán)境后沒(méi)有表現(xiàn)出任何不動(dòng)反應(yīng)（活動(dòng)性減少），但是在給與聲音信號(hào)后，可以觀察到明顯地條件性恐懼freezing反應(yīng)。

實(shí)驗(yàn)方式（2）

模型的制備：將大鼠放在動(dòng)物飼養(yǎng)室內(nèi)適應(yīng)一周。飼養(yǎng)室內(nèi)溫度為24±0.5℃，濕度為60%，光：暗周期為12h：12h（光照時(shí)間為8：00-20：00），隨機(jī)分籠單獨(dú)飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水。

A．條件性恐懼的建立：將大鼠分別放入斯金納箱（箱子底部為銅條柵欄，可通電）內(nèi),適應(yīng)2分鐘后再給予單一頻率聲音信號(hào)(4.5KHZ,60dB,30S，該聲音由美國(guó)Adobe公司的Adobe Audition2.0軟件制作)適應(yīng)4次（兩次聲音間隔1-4分鐘）,然后再給予6次以聲音信號(hào)為提示的不可逃避足底電擊(1mA,5s)，聲音與電擊同時(shí)結(jié)束，兩次聲音間隔為1-4分鐘，共28分鐘。動(dòng)物在被電擊時(shí)發(fā)生驚叫、驚跳、逃避等,聽(tīng)到聲音提示時(shí)出現(xiàn)慌張、逃避或者僵立行為（除呼吸外無(wú)其他運(yùn)動(dòng)行為），這樣建成恐懼動(dòng)物模型（以下簡(jiǎn)稱建模）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后讓動(dòng)物在斯金納箱內(nèi)繼續(xù)停留2分鐘后放回飼養(yǎng)籠飼養(yǎng)。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用90%酒精擦拭箱底，用濕布擦拭箱壁，以避免殘留氣味對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)大鼠的影響。

B．恐懼消退訓(xùn)練：24h后將已經(jīng)建立條件性恐懼的動(dòng)物再次放入斯金納箱內(nèi)，僅給予聲音信號(hào)16次，兩次聲音間隔為1-2分鐘，共24分鐘。恐懼對(duì)照組在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)放進(jìn)斯金納箱內(nèi)24分鐘，不進(jìn)行消退訓(xùn)練（不給聲音刺激）。

C．條件性恐懼消退保持測(cè)試：恐懼對(duì)照組和恐懼消退組（注：此時(shí)大鼠分為兩組：恐懼消退組和對(duì)照組）分別在恐懼消退訓(xùn)練后的第1、3、7天將大鼠放在訓(xùn)練箱內(nèi)，給予5次聲音信號(hào)，時(shí)間間隔為0.5s，記錄3分鐘內(nèi)的不僵立時(shí)間，計(jì)算3分鐘內(nèi)不僵立時(shí)間百分比，作為消退保持成績(jī)。百分比越高，表明消退保持成績(jī)?cè)胶谩?/p>

可記錄的數(shù)據(jù)和參數(shù)

1）Freezing相關(guān)：實(shí)驗(yàn)時(shí)間、freezing總次數(shù)、每次freezing時(shí)間點(diǎn)、每次freezing持續(xù)時(shí)間、freezing總時(shí)間、freezing時(shí)間占總時(shí)間的百分比。

2）活動(dòng)度相關(guān)：總實(shí)驗(yàn)時(shí)間、總距離(cm)、總平均速度(cm/s)、每個(gè)階段的時(shí)間、距離及平均速度。

晶萊生物服務(wù)流程


晶萊生物實(shí)驗(yàn)服務(wù)項(xiàng)目

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