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腦缺血及再灌注模型

時間:2020-12-25瀏覽次數:5752

       腦缺血在臨床上具有較高的發病率和死亡率,嚴重危害中老年患者健康,尋找有明確療效且作用機制清晰的預防和治療腦梗死的藥物是當前研究的前沿課題和熱點領域。因此,腦缺血動物模型的制備在科學研究中具有重要意義。


MCAO 模型制備:

      術前準備見左圖,選擇 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰臥位,頸部正中剃毛消毒備用(右圖)



        剪開頸部皮膚,鈍性分離頸部肌肉,暴露并游離單側頸動脈,穿線備用。


        動脈夾暫時夾閉主動脈,并結扎頸外動脈。主動脈用注射器針頭挑開小口,插入自制線栓到頸內動脈,大約 2.5-3cm。結扎頸內動脈,結扎主動脈近心端,松開動脈夾。


       逐層縫合,根據實驗的需要的缺血時間進行拔栓手術(再灌注),拔栓時動物要完全麻醉,把出線栓的長度約為 0.5cm。


模型成功的評判方法

        神經功能缺損(NDS)評分
        0 分:活動基本正常,無明顯神經病學癥狀;
        1 分:左側前爪無法完全伸展;
        2 分:爬行時向左側轉圈;
        3 分:行走時向偏癱側傾倒;
        4 分:不能自動行走,有意識障礙
        5 分:死亡


水迷宮實驗

       Morris 水迷宮(Morris water maze, MWM)實驗是一種強迫實驗動物(大鼠、小鼠)游泳,學習尋找隱藏在水中平臺的一種實驗,主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學習記憶能力。(左圖正常,右圖模型)


TTC 染色

        TTC 染色是常用來評價腦缺血損傷的指標,缺血區域會呈白色。


image.png

HE 染色

      一般發生缺血損傷的腦組織的神經元細胞會受到明顯損傷(上側正常,下側損傷)



TUNEL 染色

           發生損傷的腦組織,TUNEL 染色的細胞會明顯增多。


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