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心臟驟停（Cardiac Arrest, CA）是臨床急危重癥，其病理生理機制復雜，涉及缺血再灌注損傷、氧化應激、線粒體功能障礙、炎癥反應等多通路異常。動物模型是研究其機制及干預手段的重要工具，不同造模方法模擬的病理過程各有側重，需結合研究目標選擇合適模型。
一、電誘發心臟驟停模型
1. 造模方法
通過電刺激（如經靜脈或開胸電極）誘發心室顫動（VF），隨后停止自主循環，模擬心律失常導致的心臟驟停。常用動物為大鼠、豬或犬。
優點：高度可控，可精確模擬臨床電活動異常。
缺點：需侵入性操作，可能影響神經反射通路。
2. 機制通路
電生理紊亂：鉀離子外流（IKr通道阻滯）和鈣超載（LTCC通道激活）導致動作電位時程延長。
線粒體損傷：再灌注后ROS爆發，引發MPTP（線粒體通透性轉換孔）開放。
關鍵蛋白：
RyR2（蘭尼堿受體）：調控肌漿網鈣釋放，異常激活導致鈣超載。
Connexin 43（縫隙連接蛋白）：電耦聯紊亂的分子基礎。
SOD2（超氧化物歧化酶）：清除線粒體ROS的關鍵酶。
3. 相關臨床研究
抗心律失常藥物：胺碘酮（靶向多離子通道）在動物模型中可延長VF發生時間，但臨床研究（如ALIVE試驗）顯示其對院外CA患者生存率改善有限。
低溫治療：動物實驗證實低溫（33-34°C）通過抑制RyR2磷酸化減少鈣滲漏，臨床研究（TTM試驗）支持其神經保護作用。
二、藥物誘發心臟驟停模型
1. 造模方法
氯化鉀（KCl）：高濃度KCl靜脈注射導致心臟停搏。
β受體阻滯劑過量（如普萘洛爾）：抑制心臟收縮。
烏頭堿：激活鈉通道（Nav1.5），誘發持續性室顫。
適用場景：研究藥物毒性或自主神經調節。
2. 機制通路
離子通道失衡：烏頭堿通過激活Nav1.5通道引發鈉內流，導致細胞去極化和鈣超載。
凋亡通路激活：Caspase-3裂解及Bax/Bcl-2比例升高。
關鍵蛋白：
Nav1.5：心臟鈉通道α亞基，突變與遺傳性心律失常相關。
Survivin：凋亡抑制蛋白，在再灌注后表達下調。
3. 相關臨床研究
鈉通道拮抗劑：利多卡因在動物模型中可逆轉烏頭堿毒性，但臨床用于CA后ROSC（自主循環恢復）患者未顯著改善預后（ROC-ALPS試驗）。
鈣增敏劑（如左西孟旦）：動物實驗顯示其通過增強心肌收縮力改善復蘇成功率，但臨床研究（LEVO-CTS試驗）結果存在爭議。
三、窒息性心臟驟停模型
1. 造模方法
通過氣管夾閉或吸入高濃度CO?誘導窒息，導致全身缺氧和酸中毒，最終心臟停搏。
優點：模擬臨床窒息性CA（如溺水、氣道阻塞），保留神經-體液調節。
缺點：缺氧損傷與電/藥物模型機制差異較大。
2. 機制通路
缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）：激活下游促凋亡基因（如BNIP3）。
炎癥級聯反應：NLRP3炎癥小體激活，IL-1β釋放加劇腦損傷。
關鍵蛋白：
HMGB1（高遷移率族蛋白1）：作為DAMP分子觸發TLR4/NF-κB通路。
Gasdermin D：介導細胞焦亡，加重組織損傷。
3. 相關臨床研究
免疫調節治療：抗IL-1β抗體（Canakinumab）在動物模型中減少神經元死亡，臨床研究（CANTOS試驗）提示其可能降低心血管事件風險。
氫氣吸入：動物實驗顯示其通過清除羥基自由基減輕腦損傷，臨床試驗（NCT03892876）正在進行中。
四、缺血再灌注損傷模型
1. 造模方法
通過阻斷冠狀動脈（如左前降支結扎）引發心肌缺血，隨后恢復血流模擬再灌注損傷。
適用場景：研究心肌保護策略（如缺血預適應）。
2. 機制通路
ROS爆發：NADPH氧化酶（NOX2）激活產生超氧陰離子。
自噬-溶酶體失調：Beclin-1和LC3-II表達異常導致自噬流阻滯。
關鍵蛋白：
AMPK：能量傳感器，激活后抑制mTOR通路促進自噬。
GPX4（谷胱甘肽過氧化物酶4）：抑制鐵死亡的關鍵酶。
3. 相關臨床研究
遠程缺血預適應（RIPC）：動物實驗顯示其通過AMPK磷酸化減輕損傷，但臨床研究（ERICCA試驗）在心臟手術患者中未顯示獲益。
鐵死亡抑制劑（如Liproxstatin-1）：在動物模型中保護心肌細胞，尚未進入臨床III期試驗。
五、模型總結與未來方向
模型選擇：電誘發適合心律失常機制研究，窒息模型更貼近缺氧性損傷，缺血再灌注模型側重心肌保護。
靶點轉化：動物模型中有效的靶點（如NLRP3、GPX4）需結合臨床異質性（如年齡、合并癥）驗證。
多組學整合：單細胞測序與代謝組學可揭示心臟驟停后器官間交互作用。
基因編輯模型：利用CRISPR構建特定基因突變動物（如RyR2突變豬），模擬遺傳性CA。
臨床轉化挑戰：動物模型常忽略CA后全身炎癥反應及長期神經功能結局，需開發更貼近臨床的多器官衰竭模型。
晶萊生物服務流程
晶萊生物實驗服務項目
| 動物實驗 | 細胞生物學 | 病理實驗 |
| 消化系統模型 | 細胞培養 | 病理染色 |
| 胃酸分泌模型 | 普通細胞株 | HE染色 |
| 膿毒癥模型 | 細胞缺氧培養 | 油紅O染色 |
| 胃潰瘍模型 | 細胞培養+支架 | 番紅固綠染色 |
| 胰腺炎模型 | 干細胞培養 | Masson染色 |
| 肝纖維化模型 | 原代細胞分離/提取/培養 | 天狼猩紅染色 |
| DIO肥胖模型 | 細胞轉染/病毒感染 | PAS糖原染色 |
| 膽結石模型 | Trans well共培養 | 阿利新藍染色 |
| 結腸炎(UC)模型 | 細胞增殖 | 甲苯胺藍染色 |
| 脂肪肝模型 | 細胞計數 | 尼氏染色 |
| 急性肝損傷模型 | 生長曲線測定 | LFB髓鞘染色 |
| 免疫、代謝系統疾病模型 | 存活曲線測定 | 普魯士藍染色 |
| 骨質疏松模型 | ccK-8增殖檢測 | VG染色 |
| 糖尿病模型 | MTT增殖檢測 | EVG染色 |
| 高尿酸血癥模型 | CFSE檢測增殖-流式檢測 | VonKossa染色 |
| 呼吸系統模型 | BrDU檢測-免疫熒光法 | 剛果紅染色 |
| 肺纖維化模型 | 細胞凋亡 | 蘇丹黑B染色 |
| 慢性肺阻塞模型 | Annexin V/PI流式檢測細胞凋亡 | Trap染色 |
| 急性肺損傷模型 | WB檢測凋亡相關蛋白 | 抗酸染色 |
| 哮喘模型 | 透射電鏡觀察凋亡小體 | 革蘭氏染色 |
| 肺栓塞模型 | Tunel染色(POD法,DAB顯色) | AB-PAS染色 |
| 支氣管炎模型 | Tunel(熒光法,含試劑盒) | 亞甲基藍染色 |
| 泌尿生殖系統模型 | DNA ladder法 | 苯胺藍染色 |
| 慢性腎衰模型 | 細胞周期 | 熒光 DAPI染色 |
| 急性腎衰模型 | 細胞顯微計數 | 普魯士藍染色 |
| 腎間質纖維化模型 | PI染色 | 間苯二酚堿性品紅染色 |
| 腎結石模型 | BrdU滲入法 | 銀染 |
| 腎炎模型 | 免疫熒光染色 | 黑色素染色 |
| 子宮內膜異位癥模型 | PI流式檢測細胞周期 | 鍍銀染色 |
| 心血管系統模型 | 細胞運動 | PASM 六胺銀染色 |
| 冠心病模型 | Transwell檢測細胞遷移 | VG染色 |
| 心肌梗死模型 | Transwell檢測細胞侵襲 | 富爾根染色 |
| 心臟驟停模型 | 細胞劃痕 | 亞甲基藍染色 |
| 慢性心力衰竭模型 | 細胞克隆 | 碘-碘化鉀染色 |
| 動脈粥樣硬化模型 | 集落形成法/稀釋鋪板方法 | Goldner三色法染色 |
| 白血病模型 | 軟瓊脂克隆法 | PAS-萘酚磺S染色 |
| 高血壓模型 | 毛細管克隆法 | 改良苯酚品紅染色 |
| 神經系統模型 | 體外實驗血管生成 | 網狀纖維染色 |
| 腦卒中模型 | 磁珠分選細胞 | β-半乳糖苷酶染色 |
| 栓塞性腦梗死模型 | 流式分選細胞 | 鍍銀染色 |
| 腦出血模型 | 開機費 | movat五色染色 |
| 腦損傷模型 | 單色 | 維多利亞藍染色 |
| 脊髓損傷模型 | 雙色 | 免疫組化 |
| 帕金森模型 | CBA多細胞因子流式檢測 | 免疫組化預式 |
| 老年癡呆模型 | 組織/血液細胞制備 | 免疫組化正式 |
| 應激模型 | 組織單細胞制備 | 免疫熒光（石蠟-單標） |
| 骨骼疾病模型 | 中性粒細胞提取 | 免疫熒光（石蠟-雙標） |
| 骨折模型 | 其他樣本細胞制備（如血液等） | 免疫熒光（石蠟-三標） |
| 骨缺損模型 | 外周血PBMC分離 | 免疫熒光（冰凍-單標） |
| 風濕免疫性關節炎模型 | 線粒體組學 | 免疫熒光（冰凍-雙標） |
| 骨關節炎模型 | 線粒體膜電位檢測-流式法 | 制片前處理 |
| 五官疾病模型 | 線粒體膜電位檢測-免疫熒光法 | 石蠟組織包埋 |
| 眼科疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--流式 | 特殊包埋（細胞、材料、眼球等） |
| 鼻腔疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--免疫熒光 | 軟化（肝硬化、皮膚結痂、植物等） |
| 皮膚疾病模型 | 線粒體通透性轉換孔（mPTP） | 骨組織脫鈣（小） |
| 皮膚損傷模型 | 溶酶體免疫熒光法 | 骨組織脫鈣（大） |
| 腫瘤疾病模型 | 線粒體+溶酶體共定位 | 骨組織EDTA脫鈣（小） |
| 原位瘤模型 | 內質網 | 骨組織EDTA脫鈣（大） |
| 轉移瘤模型 | 線粒體鈣瞬時變化檢測-流式 | 石蠟白片 |
| 皮下植瘤模型 | ATP檢測 | 細胞爬片 |
| ADP檢測 | ||
| AMP檢測 | ||
| 流式 | DNA/RNA半定量檢測 | 基因編輯工具 |
| 組織細胞懸液處理 | pcr檢測mRNA | 合成（3保1）片段/質粒/引物合成 |
| 細胞處理 | microRNA檢測 | 質粒載體構建 |
| 血液標本處理 | LncRNA表達量的檢測 | 過表達腺病毒載體構建包裝 |
| 細胞刺激培養 | CirRNA表達量的檢測 | shRNA腺病毒載體構建包裝 |
| 單色檢測 | 凝膠電泳 | 過表達慢病毒載體構建包裝 |
| 雙色檢測 | 基因合成 | shRNA慢病毒載體構建包裝 |
| Annexin V/PI凋亡 | ＜300 | 過表達腺相關病毒載體構建包裝 |
| 細胞周期 | 300-1,500 | shRNA腺病毒載體構建包裝 |
| 1500 - 5000 | 穩轉細胞株 | |
| >5000 | ||
| 特殊序列 | ||
| ELISA | WB | qPCR |
| 組織勻漿處理 | 蛋白提取及定量一 | RNA抽提 |
| ELISA（不含試劑盒）48T/kit | WB檢測一（10孔膜/指標） | mRNA引物設計及合成 |
| ELISA（不含試劑盒）96T/kit | 灰度值分析及作圖一（10孔膜/指標） | miRNA引物設計及合成 |
| ELISA（含國產試劑盒）48T/kit | 蛋白提取及定量二 | LncRNA引物設計及合成 |
| ELISA（含國產試劑盒）96T/kit | WB檢測二（10孔膜/指標） | CircRNA引物設計及合成 |
| 灰度值分析及作圖二（10孔膜/指標） | mRNA RT-qPCR | |
| miRNA RT-qPCR | ||
| LncRNA RT-qPCR | ||
| CircRNA RT-qPCR |
收費標準/服務周期/提供結果：
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